@article{oai:phoenix.repo.nii.ac.jp:00000613, author = {定金, 豊 and 伊藤, 武朗 and 友廣, 岳則 and 木葉, 敬子 and 川原, 正博 and 今西, 重雄 and 畑中, 保丸 and 中込, 和哉 and サダカネ, ユタカ and イトウ, タケアキ and トモヒロ, タケノリ and コノハ, ケイコ and カワハラ, マサヒロ and イマニシ, シゲオ and ハタナカ, ヤスマル and ナカゴミ, カズヤ and SADAKANE, Yutaka and ITO, Takeaki and TOMOHIRO, Takenori and KONOHA, Keiko and KAWAHARA, Masahiro and IMANISHI, Shigeo and HATANAKA, Yasumaru and NAKAGOMI, Kazuya}, journal = {九州保健福祉大学研究紀要, Journal of Kyushu University of Health and Welfare}, month = {Mar}, note = {P(論文), 胎盤組織に局在するカテプシン(システインプロテアーゼ)は、ここ数年で8種類も同定されたが、いずれも遺伝子レベルの発現が確認されているだけである。本研究では、妊娠後11.5日から15.5日までのマウス胎盤でのみ発現するカテプシン-P/J (Cat-P/J)および-6 (Cat-6) に注目し、組換えタンパク質の製作による機能解明を目指した。両組換えタンパク質は大腸菌pET発現系で製作した。蛍光基質での解析により、Cat-Pはカテプシンの典型的基質であるZ-Phe-Arg-MCAとαスロンビンの基質であるBoc-Val-Pro-Arg-MCAの両者を、Cat-6は後者のみを切断することが明らかになった。これらの活性は非常に弱いものであったが、両者の基質特異性の差が初めて明らかになった。次に高活性の組換え体を得る目的で、昆虫細胞発現系での製作を試みた。組換えCat-P/Jの発現は、感染開始から4日目の培地中で最大となることを確認したが、精製するには至らなかった。, More than twenty cathepsins, a major component of trhe lysosomal proteolytic system, are identified. In the last decade, the cathepsins which show tissue-restricted expression pattern have been disconered. In placenta, eight novel genes related to cathepsin L have been recently identified. To characterize the cathepsins highly expressed in placenta, we prepare two recombinant cathepsins, cathepsins-P/J(Cat- P/J) and -6(Cat-6) by E. coli expression system with pTE-3 vector. Cat-P/J hydrolyzed both A-Phe-Arg-MCA, a typical substrate for cathepsins, and Boc-Val-Pro-Arg-MCA, a substrate for a-thronbin, while Cat-6 hydrolyzed only Boc-Val-Pro-Arg-MCA. Though these activities are very weak, this is the frist report describing the difference of substrate specificity between Cat-P/J and -6. Next we tried preparing the recombinant Cat-P/J by a baculovirus expression system becouse it had several advantage to produce functional soluble proteins. The soluble recombinant Cat-P/J wa secreted into the culture medium, and its maximum amount was observed at 4days post-infection. However, the purification of Cat-P/J was not achieved because of small amount of the recombinant proteins.}, pages = {287--297}, title = {マウス胎盤に高発現しているリソソーム・システインプロテアーゼ、カテプシン-P/Jおよび-6の組換えタンパク質の製作}, volume = {6}, year = {2005}, yomi = {サダカネ, ユタカ and イトウ, タケアキ and トモヒロ, タケノリ and コノハ, ケイコ and カワハラ, マサヒロ and イマニシ, シゲオ and ハタナカ, ヤスマル and ナカゴミ, カズヤ} }